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为什么有的培养基中要去掉酚红？

酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，桃红色表示中性pH，黄色代表酸性pH，紫色表示碱性pH。但是酚红具有一定的固醇类激素样的作用，如雌激素样作用，尤其对于所培养的哺乳类动物细胞，可能发生的固醇类反应不可忽视。为了避免酚红干扰检测结果，许多研究人员视情况不同来选择是否使用含酚红的培养基。

在培养基中加入HEPES有何好处？

培养基中最常用的缓冲体系是碳酸氢盐，它可提供营养，但却在生理pH条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的缓冲剂，能使细胞培养基在pH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。

培养基是否要添加L-glutamine（L-谷氨酰胺）？

对于所有的哺乳类动物细胞而言，L-glutamine（L-谷氨酰胺）是一种必须氨基酸。现在，所有固体包装的培养基都含有L-glutamine，因为L-glutamine在溶液中不稳定，易分解，商品化的液体培养基不含L-glutamine，如果原来培养基中不含L-glutamine或者L-glutamine已经降解，应在使用培养基之前加入适量的L-glutamine。各种培养基的L-glutamine的浓度是不同的，比如M199含有0.68mM的L-glutamine，DMEM含有4mM的L-glutamine。

液体培养基中谷氨酰胺的作用及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4℃冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。

培养基中丙酮酸钠的作用是什么？

细胞通常以葡萄糖作为碳源，丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。如果没有足够的葡萄糖供应，细胞就会选择丙酮酸钠作为代谢底物。丙酮酸是糖酵解途径中一个中间产物，也是EM（EmbdenMyerhoff）途径的第一步，所以培养基中添加的丙酮酸既可以作为能量的来源也可以为细胞的代谢提供碳骨架。

对于某些特殊的细胞，丙酮酸对维持细胞的生存是必需的，丙酮酸对于某些细胞的繁殖和低血清浓度的增殖也是必不可少。

培养基中的丙酮酸钠浓度一般是0.1 mM，商品化的丙酮酸钠一般是10 mM (100X)的溶液。